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1 原  理 

   本試驗(yàn)將不同濃度的抑菌劑混合溶解于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，然后接種細(xì)菌，通過(guò)細(xì)菌的生長(zhǎng)與否，確定抑菌劑抑制受試菌生長(zhǎng)的zui低濃度，即zui小抑菌濃度（MIC）。本方法適用于溶出性抑菌產(chǎn)品zui低抑菌濃度的測(cè)定。  

2 實(shí)驗(yàn)器材 

（1）實(shí)驗(yàn)菌株  金黃色葡萄球菌（ATCC 6538），大腸桿菌（8099或ATCC 11229），可根據(jù)抑菌劑的用途，選擇特定的菌株  

（2）營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基   

（3）稀釋液   

（4）吸管、試管

（5）37℃恒溫培養(yǎng)箱。

3 操作步驟 

（1）制備金黃色葡萄球菌、大腸桿菌懸液 

（2）含抗菌劑培養(yǎng)基配制：將抗（抑）菌溶液用蒸餾水做對(duì)倍系列稀釋成不同濃度的受試液，取各稀釋度受試液 2.5mL 加入到含 2.5mL 雙倍濃度營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中。 

（3）取 0.1mL 含菌量約為 108
cfu/mL 菌懸液接種于含抗（抑）菌劑的營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，作為試驗(yàn)組樣本。 

（4）以同樣方法接種不含抗（抑）菌劑的營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，作為陽(yáng)性對(duì)照組樣本。

（5）取2支含營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管，作為陰性對(duì)照組樣本。 

（6）將試驗(yàn)組樣本、陽(yáng)性對(duì)照組樣本及陰性對(duì)照組樣本放置 37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng) 48h，觀察結(jié)果。 
（7）試驗(yàn)中應(yīng)將試驗(yàn)用菌懸液進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)，其作用濃度應(yīng)為 5×105cfu/mL～5×106cfu/mL。

4 評(píng)價(jià)規(guī)定 

當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照管有細(xì)菌生長(zhǎng)（混濁），陰性對(duì)照管無(wú)菌生長(zhǎng)（透明），試驗(yàn)用菌懸液的作用濃度為 5×105cfu/mL～5×106cfu/mL 時(shí)， 試驗(yàn)組無(wú)菌生長(zhǎng)的zui高稀釋度所對(duì)應(yīng)的抗（抑）菌劑濃度，為該樣品對(duì)受試菌的MIC。

5 注意事項(xiàng) 

接種時(shí)，應(yīng)由低抗（抑）菌劑濃度向高濃度依次接種。